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2025年流式細胞術(shù)重磅共識盤點,建議收藏!

2025年流式細胞術(shù)領(lǐng)域發(fā)布了多項重要專家共識,其中代表性的是《流式細胞術(shù)在成熟B細胞非霍奇金淋巴瘤診斷和微小殘留病檢測中的應(yīng)用中國專家共識(2025年版)》,該共識由中國抗癌協(xié)會血液腫瘤專業(yè)委員會組織制定,針對成熟B-NHL的診斷和MRD檢測進行了系統(tǒng)規(guī)范。

流式細胞術(shù)在B-NHL中的應(yīng)用
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明確診斷:具有特征表型并常以白血病形式存在的淋巴瘤,流式的結(jié)果可以給臨床提供明確的診斷信息,如CLL/SLL和HCL;
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輔助診斷:免疫表型不具有特異性,但具有特定遺傳學(xué)或病理學(xué)特征的淋巴瘤類型,流式細胞術(shù)作為B-NHL診斷的重要補充,起到輔助診斷的作用,MZL、FL、MCL、LPL/WM、BL、LBCL等;
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MRD檢測:在CLL/SLL中廣泛應(yīng)用,其他惰性B-NHL中也有重要價值,與分子生物學(xué)檢測互補。
B-NHL免疫表型特點:
正常的循環(huán)成熟B細胞的表達特點:
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正常的循環(huán)成熟B細胞:表達CD19、CD20、CD22、CD79b、FMC7和膜表面免疫球蛋白sIg;sIg的輕鏈kappa和lambda比值基本在1∶3和3∶1之間。
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成熟過程:不成熟標志物TdT、CD34、CD10等逐漸消失,CD79a和PAX5在胞質(zhì)Ig重鏈重排時出現(xiàn);CD20在Ig輕鏈重排時才開始表達并逐步增強。
共識別描述了常見的B-NHL如MBL、CLL/SLL、MCL、FL、LPL/WM、MZL、HCL、SBLPN、SDRPL等的診斷要點及免疫表型特點,便于大家更好的去進行鑒別診斷,共識還畫出了成熟B-NHL的典型免疫表型流程圖。

圖1:成熟B細胞非霍奇金淋巴瘤的典型免疫表型鑒別診斷流程圖
檢測建議:
共識推薦可以先用一線抗體(確定樣本中存在克隆性增生的成熟B細胞)后,然后加做二線抗體(進行精準分型)。
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一線抗體:CD5、CD10、CD19、CD20、CD38、CD45、κ和λ;
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二線抗體:CD22、CD79b、FMC7、CD23、CD200、CD25、CD24、IgM、CD11C、CD43、CD103、CD81、ROR1、CD305、CD180、CD30、Bcl-2、CD138、cκ、cλ和Ki-67等。


組織樣本檢測:
另外,《流式細胞術(shù)檢測組織樣本中血液腫瘤細胞的中國專家共識》,重點闡述了在組織樣本細胞數(shù)量有限的情況下,如何通過優(yōu)化流式細胞術(shù)(FCM)的檢測流程來提高血液腫瘤診斷的準確性與效率。
當(dāng)樣本細胞量少時,優(yōu)先使用“泛篩”管進行快速篩查,鎖定異常細胞的系別來源;若樣本充足,則根據(jù)初篩結(jié)果選擇相應(yīng)的“分型”管進行深入分析,以實現(xiàn)精準的腫瘤亞型分類。

圖2:共識推薦的組織樣本診斷流程


質(zhì)量控制:
流式細胞術(shù)臨床檢驗質(zhì)量控制專家共識(2025版)》于2025年3月發(fā)布,標志著我國流式細胞術(shù)臨床檢驗質(zhì)量控制進入規(guī)范化、標準化新階段。共識涵蓋人員與空間管理、標本管理、試劑與耗材管理、儀器管理、項目管理、室內(nèi)與室間質(zhì)量控制等方面。
儀器管理:
制定日、周、月保養(yǎng)維護計劃,第一次使用、重大維修或搬移后必須校準,建議每年至少校準一次。
質(zhì)量控制:
每日使用質(zhì)控微球和細胞質(zhì)控物檢測儀器性能,定期參加室間質(zhì)評,實驗室比對計劃每年至少進行兩次。


國際指南:
《Immune Monitoring after Cell Therapy and Hematopoietic Cell Transplantation: Guidelines by the ISCT Stem Cell Engineering Committee》發(fā)表于Cytotherapy,針對血液造血干細胞移植和細胞治療的免疫監(jiān)測給出規(guī)范化建議。
免疫監(jiān)測必要性:
有效免疫重建對干細胞移植和細胞療法成功至關(guān)重要,影響患者預(yù)后。
主要監(jiān)測亞群:
干細胞移植和細胞療法后的臨床免疫監(jiān)測為患者的免疫狀態(tài)和功能進行全面評估,用于診斷和治療目的。多種免疫細胞的重建水平和功能狀態(tài)是預(yù)測患者預(yù)后的關(guān)鍵指標,主要包括追蹤免疫細胞計數(shù),以量化主要群體如T細胞、B細胞和NK細胞,以及特定亞群Tregs、耗竭細胞PD1+T、γδT細胞、DC等。
表1:HCT主要的監(jiān)測免疫細胞亞群及監(jiān)測時間

HCT,造血細胞移植;S,生存率;NRM,非復(fù)發(fā)死亡率;VR,病毒再激活;R,復(fù)發(fā);aGVHD,急性移植物抗宿主??;cGVHD,慢性移植物抗宿主??;GvL,移植物抗白血病
監(jiān)測時間推薦:
HCT后的前三個月免疫變化迅速,使得每兩周采集一次非常適合在植入和條件反射治療期間捕捉動態(tài)。建議第一年按月采集,第二年按季度采集,以研究長期免疫反應(yīng)。
細胞治療后免疫監(jiān)測策略的標準化仍迫切需要,因為實踐的差異可能影響患者結(jié)局,希望通過各類共識的落地逐步的規(guī)范監(jiān)測方案和時機,為臨床提供更加精準的信息。

今年還有一些臨床的共識都提到了流式的應(yīng)用,包括感染、自身免疫和腫瘤等多科室的應(yīng)用,列舉如下:
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艾滋病定義性腫瘤診療專家共識
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補體相關(guān)性腎病診斷和治療專家共識'
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肝纖維化非創(chuàng)傷性實驗診斷專家共識
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脊柱結(jié)核并發(fā)HIVAIDS患者診斷及治療專家共識
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結(jié)核病宿主來源生物標志物的診斷應(yīng)用專家共識
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結(jié)核分枝桿菌感染檢測技術(shù)應(yīng)用專家共識
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乳腺癌靶向PI3KAktmTOR抑制劑合理用藥管理專家共識
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血液腫瘤合并實體腫瘤診療專家共識
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中西整合淋巴瘤診療中國專家共識
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腫瘤類器官及腫瘤類器官芯片在免疫細胞治療藥物抗腫瘤效應(yīng)評價中的應(yīng)用專家共識
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原發(fā)睪丸彌漫大B細胞淋巴瘤診斷與治療中國專家共識
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惰性B細胞淋巴瘤診斷與鑒別診斷 中國專家共識
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人類免疫缺陷病毒感染相關(guān)彌漫大B細胞淋巴瘤診斷與治療中國專家共識
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中國視神經(jīng)脊髓炎譜系疾病診斷與治療指南
近幾年隨著流式細胞技術(shù)的不斷發(fā)展,國內(nèi)的專家已形成了相當(dāng)多的共識,這些共識的發(fā)布對提升臨床檢驗精準性、推動流式學(xué)科發(fā)展具有里程碑意義,為從事流式細胞術(shù)臨床檢驗的工作人員提供了科學(xué)、實用的操作指南。
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參考文獻:
1. 流式細胞術(shù)在成熟b細胞非霍奇金淋巴瘤診斷和微小殘留病檢測中的應(yīng)用中國專家共識(2025年版). Chinese Journal of Hematology, 46(2), 113-113.
2. 流式細胞術(shù)檢測組織樣本中血液腫瘤細胞的中國專家共識,
3. 流式細胞術(shù)臨床檢驗質(zhì)量控制專家共識.中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志 48.03(2025):319-330.
4. Immune Monitoring after Cell Therapy and Hematopoietic Cell Transplantation: Guidelines by the ISCT Stem Cell Engineering Committee. Cytotherapy. 2025;27(8):888-902.
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